1.紫外-可見分光光度法工作原理以及相關應用

 

紫外可見分光光度法的工作原理就是利用不同物質的 分子在紫外可見光譜區(qū)上的輻射吸收的不同，利用分子的這 一特性來進行有效地區(qū)分辨別。紫外可見分光光度法在物質 的定性定量分析以及物質純度分析物質結構分析等多種方 面都有著廣泛的應用，起著*的作用。例如：此種檢 測方法在食品行業(yè)中的運用，可以對食品的質量進行有效地 安全監(jiān)測。而對于生活質量方面來說，食品衛(wèi)生及質量是 為重要的一點，只有確保食品不會出現(xiàn)安全問題，才能夠有 效地促進國民健康生活。現(xiàn)階段，我國出現(xiàn)的食品安全問題 有以下幾種：食品造假；在食品添加對人體有害的添加劑； 一些非法添加物的濫用；除了這些主要問題之外還存在食品 殘留農（獸）藥、微生物或者重金屬等有害物質的情況，以 上情況都會造成食品出現(xiàn)質量安全問題，因此必須對食品進 行安全分析、檢測，確保食品不會出現(xiàn)質量安全問題。

 

2.紫外可見分光光度計主要技術指標

 

2.1波長準確度及其檢定方法

 

波長的實際測定值和理論值相減，就是紫外可見分光光 度計的波長的準確度。它在測試不同的儀器時，作用非常大， 是非常關鍵的技術指標。在我國，計量檢定工作，波長準確 度是很重要的。檢定紫外可見分光光度計的波長準確度有很 多的方式，下面將通過兩種方法進行壽命說明：汞燈和氖燈 的利用。

 

汞燈

 

我國在對紫外分光光度計波長準確度進行檢定時，很多 的生產廠一般都廣泛利用汞燈進行測試。具體的操作流程就 是：將原光源拆下來，采用標準燈，對標準光源燈各條的特 征譜線進行測試，波長準確度就是測量值和理論值做差。自 利用汞燈進行測試的過程中，能量測量作為測量的方式，波 段的范圍設置在245-560nm范圍之內，空氣作為樣品的參考 系，光譜帶的寬設置為2nm，再通過波長掃描。波長準確度 就是汞燈的各特征波長的測量值和其相應的理論值之差。為 了確保準確度，可以重復進行3次，波長準確度就選擇3次 的平均值。

 

氖燈

 

在對紫外可見分光光度計的波長準確度進行檢測時，通 常人們在選用標準燈時用氖燈。在儀器紫外區(qū)，由于氖燈的 連續(xù)光譜優(yōu)勢，就會在紫外區(qū)作為光源。在可見區(qū)，由于光 譜中波長為656. 1nm和為486. 0nm是很容易分離的，而且具 有高的強度，譜線特征非常明顯，所以對儀器波長準確度進 行檢定時可以利用譜線。在我國，對于儀器進行計量檢定都 會用波長準確度較為高的標準燈-氖燈。

 

2.2波長重復性及其檢定方法

 

多次測試波長之后數據符合程度，也就是多次測試波長 的數據離散性就是波長的重復性 (WavelengthRepeatability)。檢定波長的重復性方法，操 作簡單。種方法，測試波長的準確度之后，測試三次取 平均值，波長重復性就是通過和3次測試中小值或者大 值做的差；第二種，測試波長的準確度，要經過3次測試， 波長重復性就是大值與小值之差。

 

2.3光度準確度及其檢定方法

 

光度的實際測定值和理論值之差就是光度準確度 (PhotoMtricAccuracy)。它倆之間的差越小，測量就會更 準確，光度的準確度就會更高。一般，表示紫外可見分光光 度計光度的準確度有以下兩種方式：①透射比誤差或者透射 比準確度（TransmittanceAccuracy)，表示用 TA (或AT); ②吸光度誤差（AbsorbanceError)或者是吸光度準確度 (Absorbd-nceAccuracy)，在表示用 AA (或AA)時，要注 意測量時具體的吸光度情況。

 

3.紫外可見分光光度法的合理化運用 3.1溶液中物質含量的測定

 

應用紫外可見分光光度計測定標準溶液和未知液的吸 光度進而進行比較；也可先測出不同濃度標準液的吸光度， 繪制標準曲線，在一定濃度范圍內標準曲線為直線，然后測 定出未知液吸光度，即可從標準曲線上查到其對應濃度。

 

3.2化合物的鑒定

 

用不同波長的單色光分別通過某一濃度溶液，測定每一 種單色光的吸光度，之后分別以波長和分光度作為橫坐標和 縱坐標，繪制得到吸收光譜曲線。不同食品有其特定的吸收 光譜曲線，借此可以鑒定食品種類。紫外吸收光譜分析主要 用于已知物質定量分析，測定化合物中含有微量的具有紫外 吸收的雜質。

 

3.3反應動力學研宄

 

借助于分光光度法可得出特定化學反應速度常數，借此 從兩個或兩個以上溫度條件下的速度數據得出反應活化能。 3.4絡合物組成和穩(wěn)定常數的測定 金屬離子可與有機物形成絡合物且在紫外可見區(qū)有吸 收，據此可利用分光光度法來研宄其組成。

 

結語：總之，紫外可見分光光度法是利用物質分子對紫 外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析，這 種分子吸收光譜產生于價電子和分子軌道上的電子在電子 能級間的躍遷。朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分 光光度法定量分析的依據和基礎。紫外可見分光光度計在食 品檢驗中應用廣泛，主要包括定量、定性和結構分析以及反 應動力學和溶液平衡研宄。